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Pesquisa & Genética

Nova técnica permite estudo de como as proteínas mudam de forma nas células

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Compreender como as proteínas se dobram, torcem e mudam de forma à medida que realizam seu trabalho nas células é extremamente importante para a compreensão da biologia normal e das doenças. Mas uma compreensão profunda da dinâmica das proteínas geralmente tem sido difícil devido à falta de bons métodos de imagem das proteínas em funcionamento. Agora, pela primeira vez, os cientistas da Escola de Medicina da UNC inventaram um método que pode permitir que esse campo dê um grande salto em frente.

O trabalho foi uma colaboração entre o laboratório de Hahn e o laboratório do especialista em análise de imagens Timothy Elston, Ph.D.

Em que consiste a técnica

A nova técnica de “tag de aglutinação” dos cientistas, descrita em um artigo em Cell, permite aos pesquisadores identificar e rastrear proteínas que estão em uma forma desejada ou “conformação”, e fazê-lo em tempo real dentro de células vivas. Os cientistas demonstraram a técnica em, essencialmente, filmes que rastreiam a versão ativa de uma importante proteína de sinalização — uma molécula, neste caso, importante para o crescimento celular.

Segundo Klaus Hahn , coautor senior do estudo “Ninguém foi capaz de desenvolver um método que possa fazer, de forma tão generalizável, o que esse método faz. Então, acho que pode ter um impacto muito grande”.

O que é o método tag de Aglutinação

O novo método de tag de aglutinante começa com a inserção de uma minúscula “tag” molecular dentro de uma proteína que está sendo estudada, e o uso de uma molécula separada que se liga à etiqueta somente quando a proteína contendo etiquetas toma uma certa forma ou conformação, como quando a proteína está ativa para ajudar uma célula a executar uma determinada função. Colocar sinalizadores fluorescentes apropriados dentro da pasta e/ou da molécula de etiqueta efetivamente permite que um pesquisador existisse, ao longo do tempo, os locais precisos de proteínas marcadas que estão em uma determinada conformação de interesse.

Moléculas individuais seguiram dentro de células vivas. Quando mudam de cor, adotaram uma nova conformação, algo que os cientistas não puderam ver ou estudar anteriormente. Crédito: Hahn/Elston, Faculdade de Medicina da UNC

O método é compatível com uma ampla gama de faróis, incluindo os muito mais eficientes do que os pares de farol interagindo necessários para fret comuns. A tag binder pode até ser usada para construir sensores FRET mais facilmente, disse Hahn. Além disso, as moléculas de etiqueta de aglutinante foram escolhidas para que nada nas células possa reagir com elas e interferir com seu papel de imagem.

Agora, os pesquisadores estão usando a técnica para mapear a dinâmica de outras proteínas importantes.  Os cientistas prevê em que a tag de aglutinante se tornará uma técnica básica de habilitação para estudar proteínas normais, estruturas multi-moleculares maiores nas células e até mesmo as proteínas disfuncionais associadas a doenças como o Alzheimer.

“Com esse método, podemos ver, por exemplo, como as diferenças microambientais em uma célula afetam, muitas vezes profundamente, o que uma proteína está fazendo”.

Disse Hahn

“Para muitas doenças relacionadas à proteína, os cientistas não foram capazes de entender por que as proteínas começam a fazer a coisa errada”, disse Hahn. “As ferramentas para obter esse entendimento simplesmente não estão disponíveis.”

Fonte: phys.org

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